Atunci când capătul absorbant al dispozitivului de testare este introdus în proba de urină, proba este absorbită în dispozitiv prin acțiune capilară, se amestecă cu conjugatul anticorp-colorant și migrează de-a lungul mebranei preacoperite.
Atunci când nivelul unui anumit drog în probă este zero, sau atunci când acesta se găsește în probă la un nivel care este sub limita de detecție (sensibilitatea de detecție a testului) conjugatul anticorp-colorant se leagă de conjugatul drog-proteină, imobilizat în zona de testare (T).
Această reacție produce o linie colorată care indică un rezultat negativ indiferent de intensitatea liniei.
Atunci când nivelul unui anumit drog în probă este egal cu, sau mai mare decât limita de detecție a testului, drogul din probă se va lega de conjugatul anticorp-colorant, blocând legarea acestuia din urmă de conjugatul drog-proteină, imobilizat în zona de testare (T). Prin urmare, linia colorată nu poate să apară în zona de testare (T), indicând un rezultat potențial pozitiv.
Pentru a servi drept control procedural, o linie colorată va apărea în zona de control (C) atunci când testul a fost efectuat corect, indiferent dacă în zona de testare (T) apare sau nu apare o linie colorată.
